方法一：使用Curve  Expert1.4软件（点击下载Curve  Expert1.4）

标准曲线的绘制 

可以采用各种绘图软件来绘制ELISA标准曲线，下面以“Curve  Expert1.4”软件为例，绘制ELISA标准曲线的方法如下；

1．启动“Curve  Expert”

2．X轴输入标准品的OD值（双抗夹心输入OD-空白值），Y轴输入所对应的浓度值，如图：

3．单击[运行]  按钮，出现如下对话框

4．单击[ok]按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框

5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1”开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线。

（一般选择第一个多项式拟合）

6. 根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：

注意：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来进行运算。在下面的对话框

右上角有“r”值 ，当“r”值越接近1拟合度越好

7．按[Ctrl]键+[L]键，出现如下对话框：

8．输入标准的OD值，单击[Calculate]按忸，即可得到待测蛋白的实际含量（标本稀释了N倍，运算出的数值应在乘以N）。

9. 如想得到ELISA拟合曲线的方程，可在步骤6的对话框空白处右击，选择”Information”

10. 得到如下对话框：点击“Copy”

在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：

Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)

Coefficient Data:

a =   -21.531017

b =  212.05019

c =  -0.24054479

d =  0.018060778

11. 修改作图中X,Y坐标轴高度以及相关属性

选择步骤9所示图中的第二排“Graph Properties”，修改好后点击OK保存

方法二: 使用OriginPro 2021软件计算竞争法试剂盒ELISA结果

第一步：我们以PG(Progesterone) ELISA Kit 这个试剂盒为例

将标曲的数据复制粘贴在如下表框中

按下Ctrl+A键全选然后鼠标依次单击，Analysis---Fitting---Nonlinear Curve Fit---Open Dialog...

在Function Selection选项卡中，将 Category 参数设置为 Statistics

将Function参数设置为 Logistic

在Find X/Y选项卡中对 Find X from Y 进行勾选，然后单击 Fit 键

横纵坐标选择Log10参数，注意from / to 的上下限值的选择，完成后单击OK 键

最后结果计算，竞争法由于OD值与样品浓度成反比关系，所以不需要减去零孔背景值，如果是夹心法的试剂盒，则还需要事先在excel中减去背景值然后再依据教程进行计算。